(一)病原体检查
1.涂片检查： 采取急性病例的肺、肝、脾、肾、淋巴结等病变组织，直接涂片，其中以肺脏制成的涂片背景清楚，检出率较高。涂片经自然干燥、甲醇固定、用姬姆萨或瑞氏染色法染色，镜检，在细胞内寻找弓形虫。
慢性病例可检查脑中的包囊。即将脑组织置乳钵中加生理盐水研磨，然后用低倍镜检查脑组织悬液，包囊呈圆形或椭圆形，大小为30～100微米。在脑组织悬液中，包囊颜色深暗容易发现。包囊最后确定，必须通过染色 (涂片或切片)，用高倍镜检查。
2.集虫法检查： 取有病灶的肺或肺门淋巴结1～2克，放乳钵中，剪碎，研碎，加10倍生理盐水用1～2层纱布滤过，然后经500转/分离心3分钟，取其上清液，再1 500转/分离心10分钟，取其沉渣涂片、干燥、固定、染色、镜检。
3. 原虫分离：
(1) 小白鼠分离法。取肺、肝、淋巴结等做成乳剂。内脏腐败或慢性病例时，则可用脑组织做成乳剂，一般用含有青霉素1000单位/毫升及链霉素100毫克/毫升的灭菌生理盐水做成5%～10%乳剂，在室温中放置1小时，接种前振荡，待重颗粒沉底后，取其上清液，腹腔接种于小白鼠5只，每只0.5～1.0毫升。接种的小白鼠在10～20天发病，被毛逆立，食欲减少，腹腔液增多。这时可采取腹水检查虫体。阴性结果时，可将小白鼠内脏盲目传代。如果小白鼠不发病死亡，可在30～40天后将其杀死，镜检脑压片中的包囊。如虫体数量较少或毒力较弱不能致死小白鼠时，可以继续2～3代。对疑似病料，通过小白鼠3代后不发病，在脑中也未找到包囊，则可判为阴性。用作原虫分离的病料要新鲜和未经冻结过的。
对隐性感染者，一般采取横膈肌或脑30克，用绞肉机绞碎，加入10倍的0.25%～0.5%胰酶溶液，在室温中消化60分钟。当组织乳化后用纱布过滤; 离心收集沉淀物，用生理盐水洗涤1次后，注射于小白鼠腹腔分离虫体。
(2) 鸡胚分离法。弓形虫在鸡胚绒毛尿囊膜上生长良好，适于分离。即取被检材料，按常法接种于10～12日龄的鸡胚绒毛尿囊膜0.1～0.2毫升，再于35℃孵育6～7天，这样弓形虫发育旺盛。解剖、涂片、检查虫体，亦应盲传3代。
(二)间接红细胞凝集试验 根据中国农业科学院兰州兽医研究所介绍，用弓形体冻干诊断制剂 (弓形体间接红细胞凝集试验冻干抗原) 检测人和动物血清中的弓形虫抗体。本法具有快速、灵敏、特异性高等优点，适合于大规模流行病学调查用。猪发病1周后，抗体明显上升，发病后16 ～21天达高峰，1个月后抗体逐渐下降，但在4个月后仍可检出阳性反应。现介绍如下。
1. 试验准备：
(1) 被检血清。采取欲检人和动物血液2～2.5毫升，大约能分离血清1毫升 (应无细胞)，在56℃下灭活30分钟。保存在4℃下备用。
(2) 弓形体间接红细胞凝集试验冻干抗原 (冻干致敏红细胞)、标准阳性血清、标准阴性血清。兰州兽医研究所供给，并保存在4℃下备用。
(3) 器材为96 (12×8) 孔110°“V”形孔底的聚苯乙烯微量反应板、25微升容量的微量移液器、微型振荡器等。
(4) 稀释液由兰州兽医研究所供给。
(5) 反应板的洗涤。使用过的反应板在自来水管下用水冲洗后，放入4%～7%的盐酸溶液浸泡10小时左右，然后再用自来水冲洗、甩干，再用蒸馏水冲洗、晾干。也可不用酸处理，但冲洗时间需相应延长。
(6) 稀释棒的冲洗。用过的稀释棒，使头朝上，用自来水冲洗、甩干，再用蒸馏水冲洗、晾干，备用。
2. 操作方法：
(1) 将弓形虫 (体) 间接红细胞凝集试验冻干抗原，按瓶签说明书所标毫升数用灭菌中性蒸馏水稀释摇匀，1 500～2000转/分离心5～10分钟，弃去上清液，加等量稀释液摇匀，置4℃左右24小时后使用。10天内效价不变。
(2) 试验。设被检血清排、阳性对照血清稀释排、阴性对照血清稀释排。每排前7孔为血清稀释孔，第8孔即最后一孔为2%兔血清空白对照孔。加稀释液 (2%兔血清)，每孔加入75微升稀释液。在定性检查时，每个样品加4孔，定量检查则加8孔。一块反应板上定性能检测20个样品，定量仅能检查10个样品。
加被检血清、阳性对照血清、阴性对照血清，第1孔加相应血清25微升。
(3) 稀释。定性检查时，稀释至第3孔，定量检查与对照均稀释至第7孔。定性的第4孔、定量和对照的第8孔为稀释液(2%兔血清) 对照，按常规用移液器稀释，如无移液器可用25微升的稀释棒稀释。将稀释棒放入第1孔内，用左手掌右手背夹住稀释棒，左右反复搓动，使棒旋转30次以上，然后将棒夹紧、夹平提起，移入相应的第2孔内，按此法依次继续稀释，至最后一孔，将棒取出。棒上带走25微升液体，每个孔内液体仍为75微升。
(4) 加诊断液。将诊断液摇匀，每孔加25微升 (如用移液管加，每孔1滴)，加完后振荡1～2分钟，盖上1块与反应板大小相近的玻璃片或干净的白纸，以防灰尘落入，置22～37℃温箱中2～3小时后，观察结果。
3. 结果判定：
(1) 凝集标准。有以下5种：
“++++” 表示100%的红细胞在孔底呈均质而致密的膜样凝集，边缘整齐(因动力关系，膜样凝集的红细胞有时出现下滑现象)。
“+++” 表示75%的红细胞在孔底呈均质的膜样凝集，不凝集的红细胞在孔底中央沉淀成小圆点。
“++” 表示50%的红细胞在孔底呈均质而疏松的膜样凝集，不凝集的红细胞在孔底中央沉积成较大的圆点。
“+” 表示25%红细胞在孔底呈稀疏的凝集，不凝集的红细胞在孔底中央沉积成更大的圆点。
“-” 表示100%的红细胞不凝集，并集中在孔底中央，呈规则的最大圆点。
(2) 判定标准。在阳性对照血清滴度不低于1：1024 (第5孔)，阴性对照血清除第1孔允许存在前带现象外 (+)，其余各孔均为 “-”。稀释液对照为 “-” 的前提下，对被检血清进行判定。否则应检查： 操作是否正确; 反应板、稀释棒等是否洗涤干净; 稀释液、诊断液、对照血清是否有效以及其他原因。
阳性： 被检血清抗体滴度达到或超过1：64判定阳性 (抗体滴度为呈“++” 凝集的终末孔稀释倍数)。如某一被检血清的凝集现象是1：64为 “++++”、1：256为 “+++”、1：1024为 “++”、1：4096为 “+”。
(三)皮内变态反应试验
1.试验准备：
(1) 药品为皮内变态反应冻干抗原 (中国农业科学院哈尔滨兽医研究所生产)。
(2) 器材为1毫升注射器，5或6号短针头，猪鼻拧子，剪毛剪等。
2.操作方法： 将被检猪用鼻拧子固定后，在胸侧部、腹部肠骨外角水平线下，个体如太大或皮肤粗糙的猪，在耳根背面，剪毛、消毒后，皮内注射抗原0.2毫升，24小时后一次判定。
3. 结果判定：
(1) 阳性。在注射局部表皮有紫红色或黑紫色坏死灶的判为阳性。
(2) 疑似。在注射局部有弥散性肿胀10毫米以上的，判为疑似。2次判为可疑时，则可判为阳性。
(3) 阴性。注射局部无反应或肿胀在9毫米以下的，判定为阴性。
