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针对PEDV的运输车辆消毒方法比较
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概述: PED于1971年首先发现在英格兰的育肥猪群,病原PEDV1978年被分离确认。从70年代到80年代病毒在欧洲其他地区快速传播,造成了严重的腹泻与经济损失。目前PEDV是欧洲的一种地方性病原,但它并未引起大范围的发病。亚洲…
正文:

PED于1971年首先发现在英格兰的育肥猪群,病原PEDV1978年被分离确认。从70年代到80年代病毒在欧洲其他地区快速传播,造成了严重的腹泻与经济损失。目前PEDV是欧洲的一种地方性病原,但它并未引起大范围的发病。亚洲一些地区在1982年首次发现该病后,就一直没有停止。2013年5月,美国首次在猪群中发现了PEDV,病毒引起母猪和仔猪出现了严重的腹泻,并造成美国全境感染仔猪近乎100%的死亡。基因分析显示引起美国猪群发病的病毒与中国分离株的同源性接近99%,但目前还不能确定病毒是如何进入美国的。

尽管病毒进入美国的途径还不明确,但目前已经知道受污染运输车辆在猪群之间和猪群内部具有很大的传染病毒风险,这与对其他病毒如PRRSV和TGEV传播途径的认识是一致的。过去,运输工具这一潜在传播风险的消除需要通过使用一系列措施,这些措施包括清洗、消毒以及热辅助干燥和净化(TADD)等。根据对TGEV的控制效果,这些措施应该对与其结构相似的PEDV具有非常好的消毒效果,因此可以用于PEDV污染车辆的消毒。

实验设计

从2013年到2014年,共进行了4次不同的实验,以分别评价不同的车辆消毒方法。实验1主要测定了杀灭粪便中PEDV所需要的时间和温度;实验2对消毒剂Staloan F 粉(施立安)杀灭粪便中PEDV的效果进行了评估;实验3测定了Accel消毒剂杀灭粪便中PEDV的效果,在实验1和实验3进行中都没有清除设备上的粪便,这是因为我们要测定在没有进行车辆清洁前提下消毒剂的消毒效果;实验4评估了多种不同车辆消毒方法,其中包括清洗、消毒和TADD。

实验1

本实验设计了8对不同时间和温度的组合。将5ml未稀释的PEDV阳性粪便样品随机散布在面积为15.24*15.24*2.54铝盘底面,这种铝盘类似于运输车辆的底盘。然后按照表1的设计进行处理,处理后将粪便用10ml生理盐水稀释并重新收集,再灌胃感染4周龄仔猪,灌服后观察仔猪有无出现腹泻的临床症状,并采集感染后3-7天的粪便拭子用RT-PCR检测PEDV的感染状态,每个处理组内含4个重复。

实验2

本实验中设置了三个不同处理组:Stalosan F组、阳性对照组和阴性对照组。将5ml未稀释的PEDV阳性粪便样品(阴性对照组用阴性粪便样品)随机散布在面积为15.24*15.24*2.54铝盘底面,这种铝盘类似于运输车辆的底盘。处理过程中,阴性对照组和阳性对照组用密闭的罩子覆盖,以防与Stalosan F消毒粉接触。把撒布样品后的铝盘放在商业运猪车的底面和两侧,将Stalosan F消毒粉用电动喷粉器按每平方米81g的标准喷洒在整个车厢内,1h后将铝盘从车厢内取出置于20℃(室温),然后用10ml缓冲液冲洗稀释粪便并收集,其中4ml做他用,剩下约6-8ml灌服给4周龄大小的PEDV阴性仔猪,每头猪对应一个铝盘。每个处理组含8个重复。灌服后观察仔猪有无出现腹泻的临床症状,并采集感染后3-7天的粪便拭子用RT-PCR检测PEDV的感染状态。

实验3

本实验根据粪便污染程度(轻Vs重)和消毒剂浓度(1:16 vs 1:32)不同设置了6个处理组。将5或10ml未稀释的PEDV阳性粪便样品(阴性对照组用阴性粪便样品)随机散布在面积为15.24*15.24*2.54铝盘底面,这种铝盘类似于运输车辆的底盘。然后按表3的设计对各处理组用Accel消毒剂进行处理,再用10ml缓冲液稀释并回收粪便,给4周龄PEDV阴性仔猪灌服。灌服后观察仔猪有无出现腹泻的临床症状,并采集感染后3-7天的粪便拭子用RT-PCR检测PEDV的感染状态,每个处理组内含4个重复。

实验4

本实验中设置了9个不同的处理组。每个处理组中均用10ml未稀释的PEDV阳性粪便样品(阴性对照组用阴性粪便样品)随机散布在面积为15.24*15.24*2.54铝盘底面,这种铝盘类似于运输车辆的底盘。然后将铝盘按不同组合的TADD程序进行处理。再用10ml缓冲液稀释并回收粪便,给4周龄PEDV阴性仔猪灌服。灌服后观察仔猪有无出现腹泻的临床症状,并采集感染后3-7天的粪便拭子用RT-PCR检测PEDV的感染状态,每个处理组内含4个重复。

结果

实验1中,71C-10M和20C-7D组均能100%杀灭PEDV病毒,与阳性对照组相比差异显著;实验2中,Stalosan F处理组与阳性对照组相比没有显著性差异;实验3中,所有处理组均能100%杀灭PEDV;实验4中,所有处理组均能100%杀灭PEDV。

讨论

根据上述结果,对运输车辆加热71℃、10min或20℃(室温)、至少7天均可以有效杀灭PEDV。

此外,消毒剂Accel在不同病毒含量下均可以有效杀灭PEDV;而Stalosan F消毒粉不能完全杀死粪便中的PEDV。这提示我们针对不同环境条件,需要选择合适的消毒剂。消毒剂的广谱性不仅体现在它们的抗菌谱广,更为重要的是它们的理化特性复杂。这些特性包括液体、粉剂和不同的泡沫质量。对消毒剂来说抗菌谱活性非常重要,而这些理化特性更为重要,这是因为这些特性能够影响它们的应用范围和在不同条件下的消毒效果。

实验4的结果显示出了一个完整车辆消毒措施的重要性,它包括冲洗、消毒和最后的烘干(干燥)。在这一实验中,所有处理组均能有效杀灭PEDV。此外,值得注意的是在温度在车辆进行冲洗和消毒之后对杀灭病毒来说非常重要,而在实验1中温度的作用不是十分有效。

原文出处:Methods for inactivating PEDV in Hog Trailers,Twenty-second Annual Swine Disease Conference for Swine Practitioners, November 13-14, 2014

 

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