猪结核病是由结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)所引起的人畜和禽类的一种慢性传染病,其病理特点是在多种组织器官形成肉芽肿和干酪样、钙化结节病变。其很早就存在于人类生活环境中,早在2000多年前就有结核发病情况的记录,在埃及木乃伊中也发现了骨病变。在我国,结核病也曾给中华民族和动物饲养造成了严重的危害,解放后,全国开展了大规模防“痨”治结核行动,通过开展爱国卫生运动,改变人们不良的卫生习惯,提高了全民身体素质;并开展了接种卡介苗、结核菌素等措施,提高人体对结核病的抵抗力。全民结核病感染率、患病率、发病率、死亡率等有大幅度下降;同时加强对患病动物接种卡介苗结合结核菌素试验,淘汰阳性动物,使社会上对结核病总体控制能力达到一定的水平,结核病感染发病率等呈逐年下降趋势。
一、病原
引起结核病的分枝杆菌主要有三种,结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)亦称人型结核菌,主要感染人、类人猿、猴、狗、牛等,也感染猪,但对猪病变一般认为仅局限于肠膜和颈部淋巴结,但现在已发现在猪肺部出现干酪样结核病;牛分枝杆菌(M.bovis),亦称牛型结核菌,主要感染牛,但猪与病牛接触也可感染;禽分枝杆菌(M. avian),亦称禽结核菌主要感染家禽,某些哺乳动物与病鸡或病禽圈舍的垫料等接触也可感染,其中以兔和猪最易感。
猪对三型分枝结核杆菌人型、牛型和禽型均敏感。Van Es和 Martin(1925)的调查表明,在美国绝大多数结核病由禽分枝杆菌引起,而且禽分枝杆菌的血清型1,2,4和8从猪结核病灶中最常分离到(Mitcheu等,1975;Thoen等,1975b)。在美国和其它国家澳大利亚、巴西、法国、德国、日本和南非等国家至少从猪中分离出15个血清型禽分枝杆菌,由此可以看出,由禽分杆菌引起的猪结核病在世界广泛分布。在猪结核病中也分离到人型分枝杆菌。
在动物病灶内的结核杆菌比较细长而略弯曲,长1~4微米,宽0.2~0.5微米,两端钝园。单在或成丛排列。菌体内有颗粒状结构,并具有分枝状特点。无鞭毛、无荚膜、无芽孢,在人工培养基上,由于菌型、菌株、菌龄和环境条件的不同,可出现多种形态,如球形、棒状或丝状。
本菌为革兰氏阳性,一般染料难以着染,若加温或用媒染剂染色后,可抵抗盐酸酒精的脱色作用,Ziehl- Neelsen 氏染色法是常用的一种抗酸性染色法。经此法染色后,结核杆菌呈红色,其他非抗酸菌和细胞杂质均呈兰色。
结核杆菌能被荧光染料,如金胺着染,在荧光显微镜下呈现明亮的金黄色荧光。
结核杆菌为严格需氧菌,在pH6.0~8.0 均能生长,最适生长pH为6.5~6.8 。最适生长温度为37~37.5℃。生长速度很慢,据报导在人工培养基上最快的分裂速度为18小时一代,需2~6周才能出现肉眼可见的菌落。对营养要求极高,必须在含有血清、鸡蛋、甘油、马铃薯及某些无机盐的特殊培养基上,才能良好地生长,初代分离培养,更是如此。在固体培养基上,菌落呈灰黄白色,干燥颗粒状,显著隆起,表面粗糙皱缩,形式菜花状。
在液体培养其内,在液面形成粗纹皱膜,培养基保持透明,若培养液中加入吐温-80,可使结核杆菌呈分散均匀生长。
结核杆菌不发酵糖类。过氧化物酶阳性,人型结核菌能还原硝酸盐为亚硝酸盐。某些菌株能产生少量硫化氢。V-P及甲基红试验均为阴性。在牛乳中生长,牛乳无变化。
结核杆菌因含大量的脂类,抵抗力较强,对于干燥的抵抗力特别强大。在干燥痰液,病变组织和尘埃内能存活2~7个月。在阴暗处能存活数周,对直射日光较敏感。痰内细菌经照射0.5~2小时后死亡。但散光对其杀灭作用不强,虽经照射40天或更长时间,细菌仍然存活。对紫外线敏感。
结核杆菌对湿热敏感,65℃15分钟,70℃10分钟,80℃5分钟,100℃立即死亡。
结核杆菌对化学消毒药抵抗力较强,5%石灰酸和2%来苏儿,经12~24小时才能杀死。在4~5%碱液中能维持数小时。在4%氢氧化钠,3%盐酸或6%硫酸中半小时,活力不受影响,因此常用于处理有杂菌污染的样品。
二、诊断
当发生不明原因的渐进性消瘦、咳嗽、肺部异常、慢性乳腺炎、顽固性不痢、伴表淋巴结慢性肿胀等,可作为疑似本病的依据。但仅根据临床状很难确诊,病死后可根据结核病的特异性病变,容易作出诊断,必要时辅以微生物学检验。用结核菌素作 变态反应进行检疫诊断,是当前诊断本病的主要方法。
诊断猪结核病一般采用牛型和禽型二种结核菌素于两侧耳根皮内注射,24小时判定阳性反应,注射处红色扁平,直径可达3cm的肿胀;到48小时反应最强,红斑肿胀更强烈,中央部位出现并可以发生溃疡。
三、免疫
在结核菌感染的过程中,表现出了一种免疫性,这是Koch 氏现象。Koch观察到,曾受了结核菌低度感染的豚鼠,对于第二次接种强毒培养物的反应,与未曾受过第一次结核菌感染的豚鼠表现有所不同,曾受过感染的动物对第二次剂量有一定的抵抗力,而未受结核菌低度感染的豚鼠发生急性的、进行性、致死性疾病。在原有的感染上不能重迭发生新的更急性的感染,慢性疾病可以保护宿主,使之不受更急性形式的病的侵害。这种现象是一种细胞介异的免疫性,而不是体液免疫。结核分枝菌的初次感染刺激了机体产生大量对结核分枝杆菌的抗原,特异性地致敏过的T淋巴细胞在以后的感染(或重复感染)此菌时,这些特异性的T淋巴细胞即增殖并产生淋巴细胞激活素,激活吞噬细胞。
许多科研工作者都设想用人工免疫方法来预防结核病,先后研究过死菌苗、结核菌甲醇抽提物等,但所有这些都没有得到十分满意的结果。在这些有关结核的研究中,试用最多应用最广的是卡介苗(Bacillus of Calmette and Guerin , BCG疫苗)是法国学者将一个牛型结核菌株连续在饱和胆汁的马铃薯培养基上培养了13年,传代70次,它的物理特征逐渐变化,毒力减弱,最后完全失去其产生结核病的特性。多年来,这种培养物作为疫苗用于各种家畜、猴、人等,注明其有着良好的安全性,并对被接种动物产生一定的免疫效力。卡介苗使用必须在动物和人感染结核杆菌之前接种,才能产生较好的免疫效果。
目前在猪结核病的预防中,没有采用BCG疫苗。但BCG近年来在某些情况下作为免疫增强剂用于非特异性地刺激宿主抵抗各种目标,目前发出BCG能在某些情况下使宿主更能抵抗肿瘤甚至白血病,这一些可能是由于它能使T淋巴细胞活化巨噬细胞或是它能同肿瘤产生某种程度的交*反应性。BCG已在试验的基础上用于宿主抵抗力非特异性增强,特别是细胞介导免疫为主的情况下更能产生增强作用。基于以上因素,在猪结核的免疫中,应寻求一类以BCG为免疫增强剂或佐剂的疫苗来使用。通过适当的免疫计划来减轻结核对猪群的损伤。
四、治疗
从发现结核病开始,人类就幻想有一种能安全有效地治疗人类和家畜结核病的药物。由于结核病是由分枝杆菌引起的感染,这类细菌繁殖缓慢,引起的是慢性传染病,较难控制,需要长期药物治疗。抗结核病的药物品种较多,目前较常用的有链霉素、异烟肼、利福平、乙胺丁醇、对氨水杨酸和氨硫脲等。虽然异烟肼和利福平应用效果较好,但常与两或三种药物联合使用,减少在长期治疗过程中出现抗药性结核菌的可能性。
异烟肼(Isoniazid. 雷米封 Rimifon)为人工合成品,对结核病具有疗效高、毒性小、价廉易得等特点,为当前抗结核病首选药,能抑制分枝杆菌的分枝菌酸合成酶,从而阻碍分枝菌酸的生物合成。但异烟肼也容易产生耐药性。
利福平(Rifampicin,甲哌力复霉素)是天然产利福霉素SV(Rifamycin SV)的半合成品,抗菌谱广,对多种革兰氏阳性和阴性菌有强大的抑制作用。细菌对利福平容易产生耐药性,结核病单用此药治疗,容易产生耐药性。
抗结核用药一般采用早期用药;联合用药,2~3种抗结核病药联合用药,提高疗效,延缓细菌产生耐药性;用药期长,结核病是较难控制的慢性病,需长期治疗。
五、预防
建立和完善现代生物安全体系,针对疫病发生和三个基本要素,即病原体、易感动物和传播环境之间的复杂联系和相互作用,通过完善养殖场舍工艺设计,建立对动物健康有利的生态环境,通过加强管理、营养、环境控制等措施,搞好消毒、隔离和防疫等工作,增强猪群整体抗病水平,阻断病原在畜群间的传播和流行。
猪场工作人员应进行结核病检查,处于传染期或有传染倾向的员工,应在生产场外治疗;严禁在猪场内养牛和家禽等生物安全措施。
近几年,猪场和屠宰场发生的结核病例有上升的趋势,提醒我们必须注视这种人畜共患病在猪群中传播的情况,加强对猪群检疫和免疫方法的研究,采取各种生物安全措施,提高人畜群体的共同健康。