2001年10月,某生猪定点屠宰场待宰猪发生突然死亡以及神经症状的急性群发性疾病。经流行病学调查、临床症状和剖检变化观察以及实验室检验诊断为猪氟乙酰胺中毒暴发链球菌感染。严格实施了封锁隔离、消毒清洗、无害化处理和治疗病畜等控制措施,及时将疫情予以扑灭。报告如下:
1 流行病学调查
该场95头待宰猪,多数来源于县内乡镇,部份来源于邻县,凭动物产地检疫合格证明或出县境动物检疫合格证明和动物及动物产品运载工具消毒证明报验入场,留养密度约1.5头/┫,待宰时间3-7天。2001年10月3日发现一头待宰猪突然死亡,截止12日该场生猪共发病64头,死亡22头,发病率67.4 %,死亡率23.2%。
2 临床症状
生猪突然发病,精神萎顿,食欲减退或废绝,卧地不起,体温升高至41.5~42.2℃,呼吸急促,皮温不均,皮肤发红,鼻盘干燥,有浆液性鼻漏,眼结膜潮红,有的便秘,个别病猪粪便带血,有的在倒地后四肢游泳状划动,有的临死时从口鼻流出混有泡沫的暗红色液体,病程1~3天。
3 剖检变化
病死猪喉头、气管充血,有大量泡沫,肺脏充血肿胀,心包积有淡黄色液体,纤维素性渗出,心肌柔软,心内膜有出血点,脾脏肿大,呈暗红色,质脆易裂,肾脏充血、出血、肿大,胃底及小肠粘膜有点状、片状出血灶,膀胱粘膜有出血点,全身淋巴结有不同程度肿胀出血。
4 实验室检验
4.1 毒物检查
提取两次病死猪饲槽内的残余饲料及胃内容物样品各80g、饮水样品200ml,分装于三角瓶中;于实验室加入等量去离子水,振荡、提取、过滤,滤液(或饮水样品)用蒸发皿置水浴锅上蒸发浓缩至约5ml ,待冷却后加入等量无水乙醇充分浸提,取上清液作检液;分别取各检液1ml装入试管中,用1ml无水乙醇作对照管,每管加入3.5M/L的NaOH溶液10滴, 20%盐酸羟胺溶液5滴,摇匀,沸水浴5┰,取出冷却,以3.5M/L的HCl溶液调节至PH3~5,然后加入2~3滴1%FeCl3溶液。结果,只有第一头死亡猪胃内容物溶液呈均匀一致紫红色,羟肟酸反应阳性。
4.2细菌检查
无菌采取病死猪的肝、肺、脾、肾、淋巴结、心血等病料进行实验室检查。⑴直接涂片镜检:取病料抹片革兰氏染色镜检,有少量单个、成对的革兰氏阳性球菌。 ⑵分离培养:用接种环取病料划线接种鲜血琼脂平板,37℃培养24h,长出光滑整齐露珠状细小菌落,周围有β型溶血环。取典型菌落涂片镜检,见长短不一链状排列的革兰氏阳性球菌。⑶生化试验:取纯培养物接种糖发酵管作生化培养,结果该菌发酵葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖,产酸不产气,不发酵阿拉伯糖、甘露醇、山梨醇和甘油,M.R.试验、V-P试验和靛基质试验阴性。⑷药敏试验:经纸片法药敏试验,该菌对头孢氨苄、氧氟沙星敏感,青霉素G、新霉素中敏。
5 防治措施
5.1 报县政府决定封锁屠宰场,停止屠宰,厂门口设消毒池,严禁牲畜出入,进出行人及车辆严格消毒。严格隔离病猪,实施个体检疫,每天检测体温3次,严格监控猪群疫病动态。
5.2 场内环境、圈舍等彻底消毒后进行清洗。用三氯异氰脲酸钠溶液对场内车间、环境喷洒,圈舍带畜消毒,用具、饲槽浸泡消毒,1次/d。按照GB16548的规定,病死猪尸体焚烧深埋,并对周围环境彻底消毒,粪便、污物等严格进行处理无害化处理。
5.3 加强饲养管理,保持圈舍、饲槽清洁和饲料、饮水卫生,增加青绿饲料,饲料中添加强力霉素25g/100kg进行预防。
5.4 隔离治疗病猪,分别肌注氨苄青霉素0.1g/Kg体重,10%复方氨基比林10-20ml,10%维生素C 10ml,5%地塞米松5 毫升,维生素B110毫升,3次/d;重症病例静脉注射5%葡萄糖生理盐水、氨苄青霉素、地塞米松、维生素B1、维生素C、安乃近;同时肌肉注射银黄注射液。药敏试验后,部分病猪用头孢氨苄治疗,取得了更满意的效果。治疗3~4天,病猪症状消失,精神好转,食欲恢复,疫情得到了有效控制。
6 小结与讨论
6.1 流行病学调查未发现传染源,笔者认为应属于内源感染。链球菌(steptococcus)是一种条件致病菌,健康生猪的扁桃体内可携带该病原长达数月之久。该屠宰场猪源复杂,运输过程中有不同程度挤压及外伤,场内圈舍阴暗潮湿,留养密度过大,待宰时间过长,几个月来持续高温天气,猪体抵抗力下降;由于个别猪误食毒物诱发链球菌病,细菌经猪体传代毒力变强,导致这次疫情发生。
6.2 链球菌对外界环境抵抗力较强,在29~33℃的场地上可存活6d。提高管理水平,严格消毒,保持圈舍、饲料、饮水卫生,对减少该病发生有着重要作用。当前农村兽医滥用抗菌素现象比较严重,耐药菌株使常规抗菌素的常规剂量难以达到治疗效果。治疗猪链球菌病(steptococcosis suis),应经过药敏试验筛选有效抗菌药物,考虑联合用药,同时对症治疗,标本兼治,并适当增加用药剂量和频率,坚持连续用药,维持较高血药浓度,才能取得满意的效果。治愈的生猪屠宰前必须保证足够的休药期。
6.3 氟乙酰胺(fluoroacetamide,FCH2CONH2,FAA)无色无味,易溶于水,不易挥发,加温亦不失效,为剧毒的急性杀鼠剂,对人畜有剧毒,而且残效期长。通过消化道和损伤的皮肤粘膜吸收进入机体, 脱胺形成氟乙酸, 在乙酰辅酶A 和缩合酶的作用下,与草酰乙酸缩合生成氟柠檬酸,抑制乌头酸酶,使柠檬酸不能代谢为乌头酸,而在组织内大量积聚,三羧酸循环中断, ATP 生成受阻,严重影响细胞呼吸,引起中枢神经系统、心血管系统为主的毒性损害,导致动物中毒。猪对氟乙酰胺的感染性较差,致死量为0.3~0.5mg/kg体重,这次中毒应为“潜伏中毒”,因诱发链球菌病而快速致死。
6.4 屠宰检疫是活猪变成肉品的最后一道关口,应提高检疫员素质,增强防疫意识,严格控制三关(入场检疫关、送宰检疫关、宰后检疫关),建立规范的检疫记录档案,完善疫情溯源制度,发现异常个体,应进行实验室检查,排除病源生物及毒物因素,同时加强无害化处理,做到环环紧扣,减少疫病发生,防止疫病扩散,保证肉品健康安全。