(一)肝脏穿刺

肝脏穿刺是用刺针采取肝脏组织进行病理组织学检查和培养分析。本手术有经腹部和经胸廓进针两种方法。

[适应症] 采取组织进行病理组织学检查，对肝脏疾病进行确诊。

[患病宠物的准备和保定] 若发生腹水的应先抽出全部腹水，用X光摄影和触诊的方法确定肝脏的大小和性状，需要指出的是若怀疑肝脏变小或局限性疾病时，应在腹腔镜、超声图像检查指导下进行活组织检查。

[估计凝血能力] 测定血小板、激活凝血和凝血酶原的时间。使宠物在术前12小时保持安静。当采用经胸廓进针时，口服玉米油0.5～1.0ml/kg来收缩胆囊。

[方法] 经腹腔进针： 在剑突和左侧肋弓区域进行剪毛和消毒; 在左侧剑突的尾部用解剖刀刺破皮肤;仰卧时，刺针朝左前外侧方向进针。右侧卧时，朝向左肩关节进针，注意避开胆囊，其位于胸廓的剑突和关节间肋软骨凹痕的中线右侧。当针穿过腹部肌群进入腹腔后，向后迅速刺入，常很难感觉到刺针是否刺入肝实质，因此，不能刺入肝脏太深去采取样品。如果肝脏明显肿大，可将肝脏靠在体壁上不动。

可以选用下列刺针中的一种：

切割式刺针： Tru-cut14号和Framklin-modifiedvim-silverman33/8 。

切割抽吸两用针： Menghini15号和Jamshidi14～16号。

经胸廓进针： 从肋骨及肋软骨的连接处到髂肋肌-10肋骨处剪毛消毒。多数犬在肋骨和肋软骨连接处的第6肋间切口。16号Menghini刺针穿过胸膜壁，放置通管针并在中心附近放置深层保护装置。一旦刺针穿过腹壁，径直向尾端平行于胸廓壁直到膈肌，与膈的接触可觉察到，因此时刺针随呼吸而来回移动。深度保护装置进入皮肤1.25cm，这种操作可以确保刺针在肝内不至于刺得太深。抽出通管针，迅速换上抽有5～7ml无菌生理盐水的12ml注射器，用一只手把持全部装置，注射器活塞会显示3～5ml负压。在呼气完了时，将刺针快速刺入肝脏，直到深度保护装置阻止不能继续深入为止，然后迅速取回刺针，因此注射器会吸入一块组织。然后使宠物以右侧卧姿势静躺5～10分钟，让肝脏自身重力来辅助防止采样后出血。

[并发症] 出血通常可以在术后几分钟内自行止住，如果凝血测试显示凝血时间延长时不能采样。刺破胆囊或主胆管可能导致胆汁性腹膜炎或胸膜炎。邻近组织的采样通常对患病宠物无影响。刺破膈时可能导致气胸或腹水漏入胸腔。取样后注意检测下列参数： 术后1、5和24小时的血球容积和全部固形物、呼吸数、腹痛和腹水的出现。检测呕吐、发热、周围白细胞增多。

(二)肾脏活组织检查

肾脏的活组织检查是指用活组织采样针穿刺，由术者用食指固定紧靠体壁的肾脏采取样品的手术。

[适应症] 获得病理组织学检查样品。

[患病宠物的准备和保定] 通过实验室检查和X光摄影确定肾脏功能、大小和位置，通过静脉内肾盂摄影法检查是否有肾包囊炎和肾盂积水。根据肝脏皮下穿刺活体组织检查法的要求估计宠物的凝血能力。宠物在12小时内保持安静。多数采样是在常规麻醉下进行，有些精神沉郁的宠物可镇静后在局麻情况下采样，对于肾功能衰竭的猫忌用盐酸氯胺酮。让宠物采取采样侧在上的侧卧姿势，若两个肾脏都有病变，则选其一采样。

犬： 右侧肾脏更固定并且与体壁结合更紧密。左侧肾脏比右侧更突出、更暴露。

猫： 将一个肾局限于一区域固定。手指触摸(在腹膜外)进行皮下采样，不必进行切口采样。

[方法] 在肾脏外皮肤的广泛区域剪毛、消毒。在腰旁窝和腰部肌肉的腹侧缘和最后肋骨的后面等距离部做一切口，大小以能伸入2～3个手指为宜。用钝性分离腹部肌肉群，进入腹腔，用食指固定肾脏。用解剖刀在肾脏上做一个采样针刺入的针形切口。用食指引导采样针刺入肾脏。食指把肾脏固定在体壁上，同时以远离肾门的方向刺破被膜。采样针刺入肾脏，再从腹腔内抽回采样针并检查采样槽探知样品量。食指应继续固定肾脏5分钟确保止血。紧密缝合外科切口。

[并发症] 采样后出血通常在5分钟行止血，个别采样后出血需输血。虽然可见的出血较少，但多数患病宠物采样后12～72小时内窥镜检查可见出血。如果出现肾盂肾炎，炎症可能扩散到腹腔。如果肾盂积水突然破裂可能发生术后肾功能衰竭。肾脏采样后监测某些参数： 粘膜颜色、血球压积、心率、脉搏频率、膜下物质的发展变化(避免腹部触诊)、腹部疼痛、腹水，注意血尿和发热。

(三)骨髓活组织检查

通过骨髓穿刺针抽吸或环椎孔采样法(中心采样法)采取骨髓样品。

[适应症] 抽吸或中心采样法： 再生障碍性贫血、疑似骨髓病变、例如骨髓或红髓的闭止或赘痕形成、某种凝血疾病、特别是涉及血小板的。

中心采样法：研究骨髓的结构特点、当进行抽吸采样无效时、当研究转移性或隐匿性赘生形成时、骨的某种代谢性疾病。

[患病宠物的保定] 骨髓采样都可在局麻下进行。保定的方式取决于采样的位置。

长骨翼： 大犬站立或仰卧保定。小犬或猫仰卧保定，后肢拉向腹侧。股骨近端侧卧。肋骨俯卧或侧卧。

肱骨和胸骨：其他较少用的位置。

[方法] 进针位置皮肤剪毛、消毒，局部浸润麻醉。用解剖刀的刀片在皮肤上做一线形切口。抽吸骨髓选择16或18号，5cm的osgood或riosenthal采样针，放置通心管后，刺破软组织，一直深入，直到遇到骨的抵抗为止。用力同时旋转刺针使其刺入骨，抵抗减小说明刺针进入骨髓腔。刺针进入骨髓腔后，抽出套管针，接上12ml注射器抽吸，使注射器内保持负压。抽吸时伴有疼痛说明针在骨髓腔内。当注射器内有骨髓后，停止抽吸，取下注射器。过分抽吸可能导致样品被周围血液污染。迅速涂在载玻片上，血凝块保存在福尔马林中待病理组织学检查。样品可进行分离培养。如果抽出的骨髓量已够，抽出刺针，缝合皮肤切口或开放等待二期愈合。

(四)淋巴结活组织检查

淋巴结抽吸法是指将刺针经皮肤刺入周围组织淋巴结，采取细胞和液体材料进行实验室分析的方法。但该方法不能提供淋巴结的构造信息。

[适应症] 任何在大小和硬度上不正常的可触及的外周淋巴结都可以抽吸。显微镜和微生物学分析都可提供关于淋巴结病因学上的信息。细菌和微生物可由镜检或适当的培养基培养加以鉴定。脓性或肉芽肿性炎症可根据样品中的细胞类型加以鉴定。

因无淋巴结的构造分析，所以病理学家不能对赘生物确诊，如果怀疑淋巴肉瘤，可选择切除活组织检查法。

[方法] 将感染的淋巴结处皮肤剪毛、消毒。用手触摸淋巴结并加以固定。取一接有12ml注射器的20号刺针，经皮肤和皮下组织刺入淋巴结，因较大的淋巴结中部可能坏死。如果可能应尽量选择淋巴结周围部分采样。用注射器抽吸的同时刺针慢慢深入，再稍稍回抽，然后再深入，如此往复，在淋巴结内以三种不同的角度抽吸采样。慢慢停止抽吸，然后抽出刺针。

对样品马上进行处理。从刺针上取下注射器，将注射器内抽入空气，然后再连到刺针上。将注射器内空气经刺针排出，将液体和细胞涂到载玻片迅速涂片、自然干燥，或于无菌试子上准备微生物学分析。

[并发症] 并发症少见，如果技法不适当，皮肤上的微生物可能接种到淋巴结或污染样品。过分抽吸可能使样品被周围血液污染，难以做出正当的细胞学分析。

(五)关节穿刺术

关节穿刺术是指穿刺针经皮肤刺入关节腔，收集关节液进行实验室检查的方法。

[适应症] 当怀疑为关节炎性疾病时，可作为辅助诊断手段。关节滑液分析有利于鉴别败血型关节炎、间接免疫性关节炎、关节血肿和创伤性滑液渗出。注入造影物质进行X光摄影检查。评价关节炎性疾病的预后。

[保定] 根据患病宠物的体质进行温和性化学镇静和局麻。对于踝关节、肘关节和肩关节穿刺可用侧卧保定。腕关节穿刺时可采用侧卧和俯卧。

[方法] 将感染的关节外部皮肤剪毛消毒。在进针前正确触诊肿胀的关节囊或关节间隙，对于关节和关节周围组织解剖学应有全面的了解，以便正确选择进针位置。将连有3或6ml注射器的22号刺针慢慢刺破皮肤、皮下组织、关节周围组织和滑液组织，进入关节腔。用注射器抽吸，收集关节液。当收集足够的关节液后(0.1～0.5ml)，停止抽吸，取下刺针。采取的样品置于RDTA试管中，准备细胞学研究或移到加有硫甘醇酸盐的肉汤中准备微生物学分析。涂片自然干燥。在涂片时，判断液体的粘性。对于间接免疫性关节炎，应多抽吸几个关节。

[并发症] 若皮肤消毒不彻底，可能使细菌感染关节或污染样品。若操作不当，刺针引起关节滑膜内创伤可引起关节血肿或关节软骨损伤。如果忽略了关节的解剖结构，径直进针会引起关节周围血管、神经的损伤。若由操作者的原因引起出血造成样品的污染的，应穿刺其他关节或48小时后重复穿刺此关节。

(六)骨活组织检查

骨组织环锥采样法是指采取骨组织样品进行病理学和微生物学分析的方法。

[适应症] 当怀疑骨组织为下列某种疾病时，在X光摄影法诊断后，采取骨的样品进行病理组织学检查，骨的一级和二级赘瘤的形成。骨的细菌性、真菌性和寄生虫性感染。骨的发育或变性性疾病，包括全骨炎、肥大性骨发育不全、肺样肥大性骨关节病。采取培养材料。

[保定] 患病宠物进行常规麻醉。

[方法] 环绕皮肤选位置周围的广泛区域进行剪毛和外科无菌处理。用X光摄影选定位置做一个1cm的切口，切开皮下组织、肌肉、腱和深筋膜达骨膜表面。选择不带通心管的大小适宜的环锥采样工具，转动环锥引导采样工具刺穿骨皮质层，通过骨髓腔再穿过对侧骨皮质，当触摸到位于皮下组织中的环锥时表明完成全组织采样。取出环锥，插入通心管，向中心注入培养基或10%福尔马林溶液，准备分别进行微生物学的病理组织学检查。若采样位置出血，可采用直接压迫或闭合深层组织的方法止血。余下的样品进行保存，直至术者完成所采样的诊断。

[并发症] 如果采集的组织不完全或不正确，可能会出现假阴性结果，注意结合X线摄影分析和采集几份样品可降低假阴性的发生率。骨质弱化可能导致病理性骨折，选择小的环锥和限制采样份数，可避免此类问题的出现，如果认为可能发生二次病理性骨折，可以在术后在外部进行接合固定。